金沙app下载安装_首页(欢迎您)

布鲁氏杆菌抗体检测试剂盒(竞争法)

布鲁氏杆菌抗体检测试剂盒(竞争法)


【试剂盒用途】

布鲁氏杆菌抗体检测试剂盒(Brucellosis Antibody Test Kit)用于检测猪、牛、羊、犬动物血清中的布鲁氏杆菌抗体。

【试剂盒有效期】

2~8℃避光保存,有效期为12个月。



【试剂盒组分】

包被板

1/2

终止液

15 mL

酶结合物

22 mL

阴性对照

1 mL

样本稀释液

12 mL

阳性对照

1 mL

底物A

12 mL

盖板膜

1/2

底物B

12 mL

说明书

1

20×浓缩洗涤液

50 mL


【需自备的材料】

微量移液器、量筒、酶标仪(450 nm/630 nm)、去离子水、离心机(4000 rpm)、恒温培养箱(25℃)、计时器等。

【注意事项】

1.      试剂盒使用前各试剂应平衡至室温。使用后放回2~8℃保存。

2.      不同批号的试剂盒组份不得混用,不同试剂使用时应防止交叉污染。

3.      底物液和终止液不能暴露于强光或接触氧化剂。

4.      所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。

5.      稀释20×浓缩洗涤液时,如发现有结晶,应加热使其溶解后再使用。

6.      移液时,应尽量准确,防止产生气泡。

7.      应严格遵守各操作步骤规定的时间和温度。

8.      包被板为一次性用品,不得重复使用。



【操作方法】

一、试剂配制

洗涤工作液:使用前,浓缩的洗涤液应恢复至室温(2025℃),并摇动,使沉淀溶解(最好在37℃恒温培养箱中加热510 min),然后用蒸馏水作20倍稀释(例如:30 mL的浓缩洗涤液加上570 mL蒸馏水)混匀,稀释好的洗涤液28℃可存放7日。

二、样品处理

取动物全血,待血液凝固后,4000 rpm离心10 min,收集上清。也可以自然凝固析出血清,无溶血。

三、操作步骤

  1. 1.   每次试验均设置阳性对照2孔、阴性对照2孔。

  2. 2.      将血清样本和阴阳性对照品按20 μL/孔加入孔内(移液器枪头请勿混用)。

  3. 3.      每孔加入50 μL样本稀释液。

  4. 4.     每孔加酶结合物100 μL,轻微震荡混匀,盖上封板膜,置25℃恒温培养箱温育30 min

  5. 5.     小心揭开盖板膜,甩掉板孔中的溶液,每孔加入稀释好的洗涤液260 ?L,静置30 s后,弃去洗涤液。洗涤4次后在吸水纸上拍干(必须充分拍干)。

  6. 6.     将底物A液与底物B液按1:1混合均匀,加入孔中,100 ?L/孔,盖上盖板膜,置25℃恒温培养箱反应15 min

  7. 7.      每孔加终止液50 μL,使反应终止,5 min内测定结果。

【结果判定】

用酶标仪于450 nm630 nm作参比波长)读取各孔OD值。

试验成立的条件是:

阳性对照孔OD均值应<0.2,阴性对照孔OD均值应>1.0,否则试验无效。

计算方法:

PI(阻断率)=100%-(样品OD值÷阴性OD均值)×100%

阴阳性判断:

PI45%判为阳性,PI45%判为阴性。